اثبات بیماری زایی و تعیین میزبان های آزمایشگاهی یک جدایه با ژنوم تک بخشی ویروس پیچیدگی برگ زرد گوجه فرنگی از استان کرمان

ویروس پیچیدگی برگ زرد گوجه فرنگی (tomato yellow leaf curl virus, tylcv) یکی از مهم ترین ویروس های گوجه فرنگی در سرتاسر دنیا است. بیماری ناشی از این ویروس نه تنها در سراسر مناطق مرکزی و جنوبی، بلکه در تمام نواحی کشت گوجه فرنگی ایران گزارش شده است. در تحقیق حاضر به منظور ساختن سازه عفونت زای tylcv جدایه جیرفت با ژنوم تک بخشی، طول کامل ژنوم ویروس که قبلا درون پلاسمید (pgem®-t) promega بنام pgemt2.9 همسانه سازی شده بود با آنزیم psti بریده شد. سپس دو طول کامل ژنوم درون پلاسمید دوگانه pgreen0029 قرار داده شد و سازه دو تایی ساخته شده ابتدا به سلول های باکتری escherichia coli و سپس به سلول های agrobacterium tumefaciens نژاد c58 منتقل شد. جهت اثبات بیماری زایی سازه به دست آمده، مایه زنی روی سه رقم گوجه فرنگی بعنوان میزبان اصلی این ویروس انجام گردید. یک هفته بعد از مایه زنی، علائم بیماری روی گیاهان تلقیح شده به صورت پیچیدگی برگ ها، کوچک شدن اندازه برگ ها، زردی حاشیه برگ ها و کوتولگی گیاه مشاهده گردید. آلودگی گیاه گوجه فرنگی توسط آزمون pcr با استفاده از آغازگرهای عمومی تأیید شد. علاوه بر این، عکس العمل برخی از گیاهان دیگر شامل یک رقم هر کدام فلفل هندی (.capsicum annuum l)، فلفل دلمه ای (.capsicum annuum l)، لوبیا (phaseolus vulgaris l)، خیار (.cucumis sativus l) و پنج رقم از انواع توتون در برابر مایه زنی با این سازه مورد بررسی قرار گرفت.